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    用于HPLC分析的超純水——超純水之角色

    來源:賽多利斯     發布時間:2014-09-18

      糖分析是HPLC的典型應用之一,它廣泛的應用在許多測試中用以確定膜的性能,一方面可以通過糖分析來確定膜去除糖分子的能力,另一方面也可檢測膜固定化酶的活性。在高級分析中,目前通常采用薄層色譜法(TLC)、氣體色譜法(GC)以及高效液相色譜法(HPLC)進行糖分析。尤其是當混合物中包含幾種必須要分離的糖分類型時,更加需要使用這些方法。
      
      本文所描述的HPLC,洗脫液必須具有極高的物理和化學純度,并且不得含有懸浮機械性顆?;蛉魏卧诒A魰r間內由流穿色譜柱的溶解物質,因為這些溶解物質會產生干擾信號。溶劑的質量往往對HPLC分析的可靠性起到決定作用。去離子水或蒸餾水仍然含有微量的可產生鬼峰的有機物質[5]溶劑中的污染物會在固定相上不斷累積,進而導致色譜柱的堵塞,樣品運行期間壓力的上升和漂移可以證明這一點。
      
      使用arium®proVF純化水作為洗脫液
      
      HPLC所需的特殊品質的水可以從多家生產商處購買,也可以使用一個水純化系統在現場直接生產,比如arium®proVF系統。下面描述的是分離糖混合物的實驗,其中的流動相(洗脫)使用的是由arium®proVF生產的超純水。


      
      結果
      
      1.各種糖經HPLC色譜柱后的分離結果。黑色曲線:糖混合物在確定好每一種糖之后,便開始制備并分離糖混合物。
      
      2.通過注射磷酸鉀緩沖液和自來水來模擬污染物的效應或鹽的影響。
      
      注射的自來水電導率為265µS/cm,磷酸鉀緩沖液的電導率為1700µS/cm,兩者都顯示了清晰的信號,因而可以明顯地辨別為污染物。在本次分析中使用的arium®超純水的電導率為0.055µS/cm,基本不含干擾性雜質,表現為波形平坦,沒有波峰產生。
      
      分析運行過程中的柱壓恒定地維持在23bar(~334psi)。這表明了在色譜柱內沒有沉積物累積。開始和結尾的空白運行未顯示出任何改變;亦即,在流動相中沒有污染物。
      
      對不同濃度的標準系列進行分析,以確定重現性和檢測限值。以棉子糖作為這些分析的例子。保留時間和峰面積均被記錄并在表4中列出。
      
      不斷重復獲得一致的保留時間說明了具有優異的重現性。棉子糖標準系列顯示了一條濃度高達0.015mg/ml的線性曲線。
      
      根據量化樣本的峰面積生成一條標準的直線,對棉子糖研究是完全可行的。
      
      結論
      
      本文的研究結果顯示由arium®proVF生產的超純水可以即時用作上文所列水溶性糖的HPLC分析的流動相,也可用于食品分析,環境分析,制藥、化學和生物化學方面的研究,以及制藥和生物行業的工藝中質量控制測試。arium®proVF超純水在HPLC色譜法中作為流動相所開展的研究以及所獲得的優秀經驗,都使其可在不久的將來延伸用于其它分離技術,比如反相色譜,尺寸排阻色譜或超高效液相色譜技術等。
     

    責任編輯:劉嘉寧
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