糖分析是HPLC的典型應(yīng)用之一,它廣泛的應(yīng)用在許多測(cè)試中用以確定膜的性能，一方面可以通過(guò)糖分析來(lái)確定膜去除糖分子的能力，另一方面也可檢測(cè)膜固定化酶的活性。在高級(jí)分析中，目前通常采用薄層色譜法（TLC）、氣體色譜法（GC）以及高效液相色譜法（HPLC）進(jìn)行糖分析。尤其是當(dāng)混合物中包含幾種必須要分離的糖分類(lèi)型時(shí)，更加需要使用這些方法。
本文所描述的HPLC，洗脫液必須具有極高的物理和化學(xué)純度，并且不得含有懸浮機(jī)械性顆粒或任何在保留時(shí)間內(nèi)由流穿色譜柱的溶解物質(zhì)，因?yàn)檫@些溶解物質(zhì)會(huì)產(chǎn)生干擾信號(hào)。溶劑的質(zhì)量往往對(duì)HPLC分析的可靠性起到?jīng)Q定作用。去離子水或蒸餾水仍然含有微量的可產(chǎn)生鬼峰的有機(jī)物質(zhì)[5]溶劑中的污染物會(huì)在固定相上不斷累積，進(jìn)而導(dǎo)致色譜柱的堵塞，樣品運(yùn)行期間壓力的上升和漂移可以證明這一點(diǎn)。
使用arium®proVF純化水作為洗脫液
HPLC所需的特殊品質(zhì)的水可以從多家生產(chǎn)商處購(gòu)買(mǎi)，也可以使用一個(gè)水純化系統(tǒng)在現(xiàn)場(chǎng)直接生產(chǎn)，比如arium®proVF系統(tǒng)。下面描述的是分離糖混合物的實(shí)驗(yàn)，其中的流動(dòng)相（洗脫）使用的是由arium®proVF生產(chǎn)的超純水。
結(jié)果
1.各種糖經(jīng)HPLC色譜柱后的分離結(jié)果。黑色曲線：糖混合物在確定好每一種糖之后，便開(kāi)始制備并分離糖混合物。
2.通過(guò)注射磷酸鉀緩沖液和自來(lái)水來(lái)模擬污染物的效應(yīng)或鹽的影響。
注射的自來(lái)水電導(dǎo)率為265µS/cm，磷酸鉀緩沖液的電導(dǎo)率為1700µS/cm，兩者都顯示了清晰的信號(hào)，因而可以明顯地辨別為污染物。在本次分析中使用的arium®超純水的電導(dǎo)率為0.055µS/cm，基本不含干擾性雜質(zhì)，表現(xiàn)為波形平坦，沒(méi)有波峰產(chǎn)生。
分析運(yùn)行過(guò)程中的柱壓恒定地維持在23bar(~334psi)。這表明了在色譜柱內(nèi)沒(méi)有沉積物累積。開(kāi)始和結(jié)尾的空白運(yùn)行未顯示出任何改變；亦即，在流動(dòng)相中沒(méi)有污染物。
對(duì)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列進(jìn)行分析，以確定重現(xiàn)性和檢測(cè)限值。以棉子糖作為這些分析的例子。保留時(shí)間和峰面積均被記錄并在表4中列出。
不斷重復(fù)獲得一致的保留時(shí)間說(shuō)明了具有優(yōu)異的重現(xiàn)性。棉子糖標(biāo)準(zhǔn)系列顯示了一條濃度高達(dá)0.015mg/ml的線性曲線。
根據(jù)量化樣本的峰面積生成一條標(biāo)準(zhǔn)的直線，對(duì)棉子糖研究是完全可行的。
結(jié)論
本文的研究結(jié)果顯示由arium®proVF生產(chǎn)的超純水可以即時(shí)用作上文所列水溶性糖的HPLC分析的流動(dòng)相，也可用于食品分析，環(huán)境分析，制藥、化學(xué)和生物化學(xué)方面的研究，以及制藥和生物行業(yè)的工藝中質(zhì)量控制測(cè)試。arium®proVF超純水在HPLC色譜法中作為流動(dòng)相所開(kāi)展的研究以及所獲得的優(yōu)秀經(jīng)驗(yàn)，都使其可在不久的將來(lái)延伸用于其它分離技術(shù)，比如反相色譜，尺寸排阻色譜或超高效液相色譜技術(shù)等。
